Биологический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова
Опыты производились на самцах белых крыс массой 220 г. В каждой группе было по 10 животных. Крыс содержали в стандартных кюветах и в течение 13 дней поили предоставленными образцами воды В, Ф и Т. Для оценки воздействия образцов на поведение животных использовали следующие стандартные методы.
1. Метод «Открытого поля».
Открытое поле представляет собой арену диаметром 80 см с деревянным полом, расчерченным восемью диаметрами и двумя концентрическими окружностями, находящимися на равном расстоянии друг от друга. Арена окружена стенкой высотой 40 см. Над ареной на высоте 80 см помещена электрическая лампа мощностью 200 Вт, бытовой электрический звонок и красная лампа мощностью 15 Вт. При тестировании животное помещали в центр арены и в течение 2-х минут визуально оценивали следующие показатели:
- горизонтальную двигательную активность — пробег (количество пройденных секторов);
- вертикальную двигательную активность — стойки (число подъемов на задние лапы);
- отходы от стенки арены (число пересечений внешней концентрической окружности);
- выходы в центр арены (число пересечений внутренней окружности);
- умывания — груминг (число касаний морды лапами).
При исследовании фармакологических препаратов обычно используется бесстрессорная модификация «открытого поля».
2. Метод «Приподнятого крестообразного лабиринта».
Экспериментальная камера представляет собой крестообразный лабиринт (длина рукавов 35 см; высота стенок 20 см). Два противоположных рукава затемнены и закрыты с торцов стенками; два других — освещены и открыты. Лабиринт устанавливали на высоте 50 сантиметров от пола. Крысу помещали в центр лабиринта и в течение 3 минут регистрировали следующие показатели:
- латентный период захода в закрытый рукав (сек);
- общее время нахождения на свету (сек);
- свешивания с открытых рукавов лабиринта (количество);
- выходы на открытые рукава (количество);
- выглядывания из закрытых рукавов лабиринта (количество);
- стойки на свету (количество);
- умывания — груминг (количество).
Параметры 1, 2, 3, 4, 5 и 7 характеризуют уровень тревожно-фобического и эмоционального состояния животных. Параметры 3, 4, и 6 позволяют также оценить уровень ориентировочно-исследовательской реакции животных.
3. Метод «Вертикальная сетка».
Оценку статической физической выносливости животных проводили с помощью теста «Вертикальная сетка». Экспериментальная установка представляет собой проволочную сетку с ячейками 1,5х1,5 мм площадью 30х60 см. Сверху и с боков сетка ограничена деревянными стенками. При тестировании животное помещали на сетку и регистрировали время с момента посадки до момента падения с сетки. Измерения проводили 3 раза подряд, для анализа использовали максимальное время удержания.
Эксперименты выполнялись слепым методом, сведения о принадлежности воды к той или иной форме (В, Ф или Т) были получены на этапе подготовки отчета. Полученные данные подвергались статистической обработке в стандартном пакете программ STATISTICA. при сравнении средних и форм распределений применяли критерий Стьюдента и точный критерий Фишера. Отличия между группами считали достоверными при вероятности ошибки р<0,05. На графиках данные в виде (среднее ± стандартная ошибка среднего).
Результаты эксперимента
На основании результатов, полученных с использованием метода «Открытое поле», можно заключить, что вода варианта Ф (фильтр Zepter) усиливает двигательную активность и число выходов животных в центр арены, что свидетельствует о патологическом снижении тревожности крыс, приводящему к утрате чувства осторожности и увеличении риска попадания в критические ситуации (Рис. 1).
Вода варианта Т (фильтр + генератор) нормализует состояние животных достоверно возвращая поведенческие параметры к контрольному уровню (Рис. 1).
* — достоверные отличия от группы В (р<0.05), ** — (р<0.01) соответственно |
# — достоверные отличия от группы Ф (р<0.05), ## — (р<0.01) соответственно |
В тесте «Приподнятый крестообразный лабиринт» было показано, что потребление воды Ф достоверно увеличивает время пребывания крыс на освещенных участках лабиринта, а также число свешиваний со светлых концов лабиринта и число выходов в центр. Полученные данные указывают на значительное снижение эмоциональной тревожности и утере крысами осторожности (Рис. 2).
Потребление воды Т практически полностью нормализует состояние животных, приводя показали поведения к уровню контрольной группы В (Рис. 2).
Потребление воды образцов Ф и Т не влияло на физическую выносливость экспериментальных животных, которую оценивали в тесте «Вертикальная сетка». Заключение.Из полученных экспериметальных данных можно заключить, что вода, пропущенная через фильтр Zepter , приобретает свойства нейротропного вещества, повышая ориентировочно-исследовательскую реакцию и снижая тревожность крыс. Этот эффект нельзя считать полезным, т.к. животные со сниженной осторожностью в природных условиях обречены на быструю гибель. Потребление воды группы Т (Zepter + генератор) не приводит к описанным выше неблагоприятным последствиям, и поведение животных сохраняется на исходном оптимальном уровне. Потребление всех образцов воды не влияет на физическую выносливость белых крыс. |